Что такое растительное сырье

Вода

В тканях растущих вегетативных органов растений содержание воды колеблется от 70 до 95%, а в запасающих тканях семян и в клетках механических тканей — от 5 до 15%. По мере старения растений общий запас и относительное содержание воды в тканях, особенно репродуктивных органов, снижается.

Функции воды в растениях обусловлены присущими ей физическими и химическими свойствами. Она обладает высокой удельной теплоемкостью и благодаря способности испаряться при любой температуре предохраняет растения от перегрева. Вода — прекрасный растворитель для многих соединений, в водной среде происходит электролитическая диссоциация этих соединений и усвоение растениями ионов, содержащих необходимые элементы минерального питания. Высокое поверхностное натяжение воды определяет ее роль в процессах поглощения и передвижения минеральных и органических соединений. Полярные свойства и структурная упорядоченность молекул воды обусловливают гидратацию ионов и молекул низко- и высокомолекулярных соединений в клетках растений.

Вода является не просто наполнителем растительных клеток, но и неотделимой частью их структуры. Оводненность клеток тканей растений обусловливает их тургор (давление жидкости внутри клетки на ее оболочку), является важным фактором интенсивности и направленности разнообразных физиологических и биохимических процессов. При непосредственном участии воды происходит огромное число биохимических реакций синтеза и распада органических соединений в растительных организмах. Особое значение вода имеет в энергетических преобразованиях в растениях, прежде всего в аккумуляции солнечной энергии в виде химических соединений при фотосинтезе. Вода обладает способностью пропускать лучи видимой и близкой к ней ультрафиолетовой части света, необходимой для фотосинтеза, но задерживает определенную часть инфракрасной тепловой радиации.

Содержание воды в растениях зависит от вида и возраста растений, условий водоснабжения, транспирации и в определенной степени от условий минерального питания. Влагообеспеченность наряду с другими факторами внешней среды оказывает значительное влияние на величину, качество урожая сельскохозяйственных культур и эффективность удобрений.

Лекарственные формы лекарственного растительного сырья

Некоторые лекарственные растения можно принимать в пищу в натуральном виде. Например, в качестве добавок в салаты, супы.

Из фруктов и овощей можно приготовить соки или варенье. Но далеко не каждое растение имеет приятный вкус, чаще всего растения собираются в определенную фазу роста, сушат, сортируют по частям, содержащим определенные биологические активные вещества. После этого, формируют лечебные фитосборы или готовят разнообразные лекарственные препараты.

Порошки получают, когда сухое сырье измельчается непосредственно на заводе изготовителе и в ступке или при помощи кофемолки в домашних условиях. Чаще всего порошки, приготовленные самостоятельно применяют наружно для присыпки ран, опрелостей.

Для использования отваров и чаев их упаковывают в фильтр-пакеты в заводских условиях. Еще одним методом расфасовки являются капсулы, которые очень удобны в применении. Ранее применялись прессованные блоки или таблетки, но в последнее время их изготавливают все реже.

Настои, отвары, чаи приготавливаются из сухого измельченного лекарственного сырья. При этом следует точно соблюдать пропорции указанные на упаковке. Все они рассчитаны и обоснованы нормами ФС.

Заваривать сырье следует в неметаллической посуде (настои в течение 15 минут, отвары – 30 минут). После остывания отвар процеживают и разбавляют кипяченой водой, до объема указанного в инструкции.

При наружном применении можно использовать концентрированный отвар. Изготавливаемые в домашних условиях настои не обладают таким же сильным эффектом, как промышленные. Это связано с тем, что кустарным способом не удается извлечь из растения все активные вещества полностью.

Настои и отвары имеют очень короткий срок хранения, поэтому готовятся небольшими порциями.

По технологии изготовления настойки очень похожи на настои, но в этом случае применяются вместо воды спирт.

Если для приготовления настоев может применяться как сухое, так и свежее сырье, то для настоек чаще всего берут зеленую массу, которую заливают 70% или 40% спиртом.

Емкость заворачивают в непрозрачный материал или убирают в темное место. Срок изготовления составляет около 7 дней. После этого биомассу отжимают. Всю жидкость отцеживают. Применяются настойки небольшими дозами, разбавляя их водой.

В случаях настоек на ядовитых растениях прием ведется строго по определенной схеме, при полном контроле самочувствия больного со стороны врачей.

Настойки имеют более продолжительный срок хранения единственным условием, которого является защита от солнечных лучей.

Вытяжки — этот вид лечебных препаратов изготавливается только в заводских условиях. В аптеки он поступает как водные, так и спиртовые вытяжки. Кроме того создаются препараты для инъекций.

Для изготовления мазей чаще всего применяют подземные части растений. Для этого полученные в заводских условиях из лекарственного сырья биологически активные вещества смешивают с основой, в качестве нее может использоваться медицинский вазелин, растительные масла, сливочное масло или несоленый животный жир.

Ванны очень эффективны при лечении различных проблем кожи. Применяются как для детей, так и для взрослых. Для приготовления используют настои, которые разводят водой 37 градусов. Продолжительность приема ванны с лекарственными травами составляет от 10 до 20 минут. Обычно такие процедуры проводятся 2-3 раза в неделю. Противопоказанием могут стать проблемы в работе сердечно-сосудистой системы, различные новообразования. Перед курсом подобной терапии следует проконсультироваться с врачом.

Аппликации чаще всего применяются при воспалительных процессах поясничного отдела позвоночника или суставов. Свежие или распаренные растения укладываются непосредственно на больной участок тела, оборачиваются целлофаном, утепляются. Они могут быть горячими, теплыми, холодными.

В лечебных целых применяют свежевыжатый сок. Сочетание определенных фруктов, овощей, корневищ и плодов позволяет не только избавить организм от шлаков и пополнить запас витаминов, но поднять иммунитет, гемоглобин

Применяя свежие соки важно помнить, что не все их можно пить в концентрированном виде. Если некоторые из них мягко воздействуют на слизистую, то другие способны вызвать острое раздражение и повышение кислотности

Важность растительного сырья в косметической индустрии

Растительное сырье играет важную роль в производстве косметических средств. Зеленые и плодородные дары природы обладают уникальными свойствами, которые способствуют здоровью и красоте кожи, волос и ногтей.

Одним из основных преимуществ растительного сырья является его природное происхождение. Значительная часть растительных компонентов изготавливается из натуральных растений и растительных экстрактов, что делает их безопасными для использования. Они лишены вредных химических добавок и синтетических ингредиентов, которые могут вызывать раздражение или аллергические реакции.

Лекарственные свойства растительного сырья также неоспоримы. Многие растения имеют выраженные антибактериальные, противовоспалительные и заживляющие свойства. Использование растительных экстрактов в косметических средствах помогает бороться с акне, уменьшает воспаление и ускоряет процесс регенерации кожи.

Растительное сырье также богато полезными веществами, такими как витамины, микроэлементы и антиоксиданты. Витамины А, Е и С являются мощными антиоксидантами, которые помогают защитить кожу от свободных радикалов и предотвращают преждевременное старение. Минеральные элементы, такие как цинк, железо и селен, укрепляют волосы и ногти, делая их более здоровыми и крепкими.

Необходимо отметить, что растительное сырье также является экологически чистым и устойчивым источником ингредиентов для косметической промышленности. Выращивание и переработка растительного сырья не причиняет вреда окружающей среде и не вызывает загрязнение водных ресурсов.

Все вышеперечисленные факторы делают растительное сырье неотъемлемой частью косметической индустрии. Применение растительных компонентов в косметических средствах позволяет получить эффективные и безопасные продукты, способствующие уходу за кожей и волосами, а также сохранению природной красоты.

Производители и поставщики лекарственно-растительного сырья

Российские компании занимаются производством и поставками различного лекарственно-растительного сырья.

«Красногорслексредства» (Красногорский завод лекарственных средств) – крупнейший и старейший в России производитель лекарственных трав и сборов ведет работу с 1938 года. Компания «Здоровая семья Алтай» выпускает целый ряд уникальных препаратов с биологически активными добавками.

Компания «Растительный мир» – поставщик многих видов лекарственно-технического сырья. Предприятие «Биотест» предлагает более 50 наименований лекарственных средств.

НефтехимияУчебные заведения нефтехимииБитумно-полимерные материалы

Сырье — растительное происхождение

Сырье растительного происхождения для получения искусственного шелка имеет волокнистое строение и состоит из целлюлозы, но его нельзя переработать непосредственно в текстильные изделия, ввиду малой длины волокон.
 

В лакокрасочной промышленности сократилось потребление сырья растительного происхождения, прежде всего пищевого, и возросло использование синтетических продуктов, вырабатываемых из нефтехимического сырья.
 

Хлопчатобумажный корд, изготовляемый из сырья растительного происхождения, не может обеспечить необходимые — показатели качества. Так как качество этого корда зависит от содержания в нем влаги, он не может сохранять прочность при высоких температурах.
 

Сельскохозяйственное сырье в свою очередь подразделяется на сырье растительного происхождения ( зерновые культуры, хлопок, лен, картофель, сахарная свекла, древесина, лекарственные травы и др.) и животного происхождения ( мясо, рыба, молоко, шерсть и пр.
 

До начала XIX века уксусную кислоту получали исключительно из сырья растительного происхождения — при пироге-нетической обработке древесины, либо уксуснокислым брожением пищевого этилового спирта.
 

Исследован процесс сорбции органических красителей на новом сорбенте из сырья растительного происхождения. Оценены термодинамические характеристики адсорбции.
 

Практический интерес представляют способы совместного гидролиза активного ила и сырья растительного происхождения, например, древесины. Такой способ разработан в лесотехнической академии им.
 

Был исследован процесс биоконверсии смеси органических отходов животноводства и трудногидролизуемого сырья растительного происхождения с дополнительным внесением в исходную смесь в качестве биостимуляторов солей аскорбиновой кислоты и металлов. Внесение БАД практически всегда интенсифицировало процесс биоферментации.
 

Расширение производства и улучшение качества водорастворимых пленкообразователей связано с заменой сырья растительного происхождения на синтетическое. По сравнению с маслами жидкие каучуки, являющиеся карбоцепными полимерами, обладают повышенной щелочестойкостью, на их основе получаются материалы, характеризующиеся высокой стабильностью водных растворов и улучшенными защитными свойствами. После нейтрализации амином аддукты неограниченно разбавляются водой и могут быть использованы для нанесения защитных покрытий любыми методами.
 

Нами был исследован процесс биоконверсии смеси органических отходов животноводства и трудногидролизуемого сырья растительного происхождения с дополнительным внесением в исходную смесь в качестве биостимуляторов солей аскорбиновой кислоты следующих металлов: кальция, калия, натрия, кобальта, марганца, магния, цинка и железа.
 

Искусственные волокнистые материалы можно разделить на следующие группы: 1) из сырья растительного происхождения — шелк вискозный, медноаммиачный, ацетатный; 2) из сырья животного происхождения — казеиновое волокно; 3) синтетические — капрон, нейлон.
 

Ведение процесса приготовления массы из асбеста, кожевенных отходов, макулатуры и другого сырья растительного происхождения в роллах, конических мельницах и гидропульперах для отлива асбестовой бумаги и фильтров, асбестового и стелечного картона.
 

Рассмотрены строение, структура и химический состав мяса сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы, молока и молочных продуктов, а также сырья растительного происхождения. Дано обоснование выбора и режима технологических процессов. Освещены вопросы сохранения пищевой ценности консервов для детей.
 

Тонкость фильтрования при очистке масла И-20 через бумагу.| Механические свойства фильтровальной бумаги.

Наряду с этим в зарубежной практике для изготовления фильтрующих элементов, устанавливаемых в фильтрах масляных систем двигателей, применяют специальные сорта бумаги и картона, вырабатываемые из чистого хлопкового линтера или другого тонковолокнистого сырья растительного происхождения.
 

Правила заготовки дикорастущих лекарственных растений

К заготовке растений в естественной среде допускаются сборщики, прошедшие специальную подготовку и ознакомленные с требованиями положения, регламентирующего этот вид деятельности. Эти требования различаются в зависимости от морфологии ЛРС, его химического состава и других факторов.

Производить сбор дикорастущих растений или их частей разрешается только в местах, где данный вид широко распространен и условия для его развития оптимальны. Кроме того, обязательно оценивается качество ЛРС, важнейший показатель которого – содержание биологически активных веществ (БАВ). Этот показатель не является стабильным: как правило, содержание БАВ меняется в зависимости от стадии развития растения. Кроме того, на него оказывают влияние влажность, температура, освещенность и другие особенности климата, сезона, суточных циклов.

Специалистами разработаны методички с указанием:

• оптимальных календарных сроков сбора различных видов растительного сырья в каждой географической зоне;
• времени суток, в которое заготавливаемые части растений содержат наибольшее количество БАВ.

Роса резко ухудшит качество заготавливаемого сырья

В большинстве случаев рекомендуемое время сбора – с 10.00 до 13.00, однако некоторых веществ, таких как, например, эфирные масла, в растительном сырье больше в утренние часы. Надземные части растений во время сбора должны быть сухими. Поэтому их не рекомендуется собирать не только в дождливую погоду, но и тогда, когда из-за смены температуры (утром и вечером) появляется роса.

Кроме того, следует визуально определять состояние растения и избегать заготавливать сырье, поврежденное микрофлорой или насекомыми, а также отличающееся по цвету, запаху, размерам.

Повторная заготовка подземных частей растений (клубней, корневищ) на одном и том же месте разрешается не ранее, чем через 5 лет, травянистых стеблей – через 2 года. Листья, цветы и плоды можно собирать ежегодно.

Info

Publication number

RU2664148C1

RU2664148C1

RU2017131577A

RU2017131577A

RU2664148C1

RU 2664148 C1

RU2664148 C1

RU 2664148C1

RU 2017131577 A

RU2017131577 A

RU 2017131577A

RU 2017131577 A

RU2017131577 A

RU 2017131577A

RU 2664148 C1

RU2664148 C1

RU 2664148C1

Authority
RU
Russia

Prior art keywords

extract
amino acid
extracts
acid composition
raw materials

Prior art date
2017-09-11

Application number
RU2017131577A
Other languages

English (en)

Inventor
Павел Павлович Хорошутин
Original Assignee
Павел Павлович Хорошутин
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
2017-09-11
Filing date
2017-09-11
Publication date
2018-08-15

2017-09-11Application filed by Павел Павлович Хорошутин
filed

Critical

Павел Павлович Хорошутин

2017-09-11Priority to RU2017131577A
priority

Critical

patent/RU2664148C1/ru

2018-08-15Application granted
granted

Critical

2018-08-15Publication of RU2664148C1
publication

Critical

patent/RU2664148C1/ru

2018-09-17Priority to PCT/RU2018/000610
priority

patent/WO2019050436A1/ru

Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья

Подобный анализ представляет собой ряд анализов сырья, на основании которых можно определить подлинность и качество сырья

Имея дело с растительным сырьем, важно быть уверенным в том, что оно соответствует названию растения

Иногда разные виды растений настолько похожи друг на друга, что визуально отличить их сложно. За то химический анализ сразу выявляет подмену. Кроме того, растения, собранные в дикой природе всегда могут содержать в себе различный мусор: помет птиц и животных, фрагменты других растений, камни, песок.

Для проведения подобного типа исследований применяются следующие методики: макроскопический, микроскопический, фитохимический, люминисцентный, биологический, товароведческий.

Эксплуатация растительного сырья в производстве биотоплива

В современном мире проблема энергетической зависимости и экологического кризиса стала особенно актуальной. Одним из путей решения этой проблемы является использование биотоплива – вида возобновляемого и экологически чистого источника энергии. Растительное сырье играет ключевую роль в производстве биотоплива, поэтому его эксплуатация имеет большое значение.

Под растительным сырьем понимаются различные растительные материалы, которые могут быть использованы для производства биотоплива. Это могут быть сельскохозяйственные культуры, отходы производства пищевой промышленности, древесина и другие биологические материалы.

Для получения биотоплива из растительного сырья применяются различные технологии. Наиболее распространенные из них – это процессы биоэтанола и биодизеля. Для получения биоэтанола растительное сырье подвергается ферментации и дистилляции, а для производства биодизеля используется процесс трансэстерификации. В результате данных процессов получается специальное топливо, которое может использоваться в качестве альтернативы нефтяным продуктам.

Важно отметить, что эксплуатация растительного сырья в производстве биотоплива имеет свои особенности. Во-первых, урожайность сельскохозяйственных культур может оказаться недостаточной для обеспечения массового производства биотоплива

Поэтому для увеличения производства используются различные генетически модифицированные растения, а также осуществляется поиск альтернативных источников растительного сырья.

Во-вторых, эксплуатация растительного сырья ведет к конкуренции сельскохозяйственной промышленности и пищевой отрасли. Использование определенных видов растений для производства биотоплива может снижать пищевую безопасность и приводить к повышению цен на продукты питания

Поэтому важно находить баланс между использованием растительного сырья для производства биотоплива и его использованием в пищевой промышленности

Несмотря на эти сложности, эксплуатация растительного сырья в производстве биотоплива имеет значительные преимущества. Во-первых, использование биотоплива способствует снижению выбросов парниковых газов и борьбе с климатическими изменениями. Во-вторых, производство биотоплива на основе растительного сырья может способствовать развитию сельского хозяйства и сельских районов, создавая новые рабочие места и улучшая экономику.

1. Преимущества эксплуатации растительного сырья в производстве биотоплива:

• возобновляемый источник энергии;
• снижение выбросов парниковых газов;
• развитие сельского хозяйства и экономики.

Особенности эксплуатации растительного сырья в производстве биотоплива:

• недостаточная урожайность сельскохозяйственных культур;
• конкуренция с пищевой промышленностью;
• необходимость поиска альтернативных источников растительного сырья.

В целом, эксплуатация растительного сырья в производстве биотоплива является перспективным направлением развития энергетики, которое способствует снижению экологического воздействия и созданию устойчивой энергетической системы.

Похожие патенты RU2664148C1

название	год	авторы	номер документа
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ПЕРЕРАБОТКИ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ СХЕМА КОМПЛЕКСНОЙ ПЕРЕРАБОТКИ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ	2013	Левин Борис Давидович Иванова Марина Вячеславовна Гуров Павел Владимирович Пчелинцева Анна Станиславовна	RU2539500C1
Способ получения экстракта, содержащего биологически активные соединения фенольной природы, из гречихи посевной	2021	Павловская Нинэль Ефимовна Горькова Ирина Вячеславовна Гнеушева Ирина Алексеевна Солохина Ирина Юрьевна Агеева Наталья Юрьевна	RU2764217C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУХОГО ЭКСТРАКТА ЦИКОРИЯ	1999	Трубников А.А. Фурса Н.С. Литвиненко Василий Иванович Аммосов Алексей Серафимович Попова Татьяна Павловна Дыгай А.М.	RU2173557C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТЕВИОЗИДА	2002	Голубев В.Н. Беглов С.Ю.	RU2250041C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ФЕНОЛЬНОЙ ПРИРОДЫ ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ	2014		RU2604141C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОЛОЧНО-РАСТИТЕЛЬНОГО НАПИТКА ИЗ ТРАВЫ СТЕВИИ	2012	Трухачев Владимир Иванович Сычева Ольга Владимировна Стародубцева Галина Петровна Веселова Марина Владимировна Путрина Анна Евгеньевна	RU2501284C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТИМУЛЯТОРА РОСТА ДЛЯ СЕМЯН ХВОЙНЫХ РАСТЕНИЙ	2022	Коротков Александр Анатольевич Кох Жанна Александровна	RU2790247C1
СПОСОБ ПЕРЕРАБОТКИ КОРЫ ДЕРЕВЬЕВ ХВОЙНЫХ ПОРОД	2008	Григорюк Галина Петровна Сластников Иван Ильич Старостина Елена Борисовна Продаевич Владимир Григорьевич Левин Дмитрий Владимирович	RU2400357C2
Способ получения сухого экстракта семян каштана конского обыкновенного	2018	Азаркова Алина Федоровна Мешков Андрей Иванович Шейченко Ольга Петровна Шейченко Владимир Иванович Ильин Михаил Михайлович Федотчева Татьяна Александровна Шимановский Николай Львович	RU2665630C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ДИУРЕТИЧЕСКОЙ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ	2006	Азаркова Алина Федоровна Быков Валерий Алексеевич Даргаева Тамара Дарижаповна Жукова Ольга Леонидовна Мондодоев Александр Гаврилович Николаева Галина Григорьевна Николаев Сергей Матвеевич Попова Наталья Александровна Сокольская Татьяна Александровна Стихин Вячеслав Алексеевич	RU2318531C1

Основы заготовки лекарственно-растительного сырья

Еще в прошлом веке лечением травами занимались сельские женщина, знания к которым приходили от их матерей. Они точно знали, в какое время, какую траву можно было собирать, чтобы она имела наибольшую силу.

Каждое растение должно быть убрано в соответствующий этап своего развития, когда его лечебный эффект имеет наибольшую интенсивность

При этом при заготовке ядовитых растений необходимо соблюдать меры предосторожности, чтобы не получить химический ожег, раздражение слизистой глаз или аллергической реакции

Теперь заготовка лекарственных растений носит промышленный масштаб и этих правил придерживаются лишь приблизительно. Однако есть ряд правил, которыми нельзя пренебречь:

Перед началом заготовительных работ следует получить разрешение на них от лесхоза или лесничества.

1. Никогда не выкапывать все растения. По нормам на 1 м. ка следует оставлять одно взрослое растение;
2. Следующий раз на эту делянку можно будет наведаться только 5-8 лет;
3. При заготовке надземных частей травы следует оставлять более 60 % от зеленной массы. При этом не должны повреждаться те части растения, которые не подлежат заготовке;
4. Существует ряд дополнительных требований при сборе ядовитых растений;
5. К заготовкам допускаются только лица, достигшие 18 лет;
6. Работы ведутся под руководством опытного фармацевта;
7. Во время работ запрещается тереть глаза, лицо, пользоваться косметикой и принимать пищу;
8. Собирать можно только одно наименование;
9. Иметь при себе аптечку и обладать навыками оказания первой медицинской помощи при отравлениях.

Растительное сырье: основные понятия и значение

Растительное сырье – это материал, получаемый из растений и используемый в различных отраслях жизнедеятельности человека. Оно является источником ценных органических соединений, энергии, витаминов, минералов и других полезных веществ.

Использование растительного сырья широко распространено в пищевой промышленности, медицине, косметологии, текстильной промышленности, производстве биотоплива и других сферах.

Одним из ключевых понятий в области растительного сырья является биомасса. Это общая масса растений или их остатков, которые могут быть использованы в качестве сырья для получения энергии или других полезных продуктов.

В зависимости от своего происхождения, растительное сырье можно подразделить на несколько видов:

• Пищевое растительное сырье – это материалы, используемые в производстве пищевых продуктов. К ним относятся зерновые культуры (пшеница, рис, кукуруза и другие), овощи, фрукты, ягоды, орехи и другие съедобные растения.
• Лекарственное растительное сырье – это растения, используемые для получения лекарственных препаратов. Они содержат биологически активные вещества, способствующие выработке лечебного эффекта. Примеры такого сырья: лекарственные травы, корни, плоды и другие части растений.
• Техническое растительное сырье – это материалы, используемые в промышленности для получения различных продуктов. К ним относятся целлюлоза, древесина, волокна, каучук, растительные масла и другие вещества, которые широко применяются в различных отраслях производства.

Значение растительного сырья трудно переоценить. Оно является основой для производства пищи, лекарств, энергии и других важных товаров и услуг. В то же время, умелое использование растительного сырья помогает снизить негативное воздействие на окружающую среду и обеспечить устойчивое развитие человеческой цивилизации.

Методика определения видовой принадлежности мяса с использованием тест-систем иммунодиффузии серии 34 ORBIT, РИМЕ, SOFT, PROFIT (США)

Для выделении ДНК использовали СТАВ-буфер, включающий следующие компоненты: 3%- СТАВ, 1.4M-NaCL, ШОмМ TrisHCL до рН 7.8-8.0 и ЗОмМ EDTA.

Смесь буфера с исследуемым образцом инкубировали 20 минут при температуре 50С. Проинкубированный образец центрифугировали при комнатной температуре 10000g в течение 15 минут.

Надосадочную жидкость в объеме 300-500 мкл очень аккуратно, не захватывая осадок и капли жира, переносили отдельными наконечниками с аэрозольными фильтрами в новые пробирки.

ДНК растворяли и очищали с помощью иммуномагнитосепарации с «Silica» (Si02). Смесь центрифугировали при 16000 об/мин (10000g) в течение 10 мин. Элюат ДНК собирали в отдельную пробирку и переосаждали изопропанолом. Осадок растворяли в 50 мкл ТЕ-буфера. Выделенную и очищенную ДНК использовали для постановки ПЦР или хранили при -20С до использования. Кроме того, после обработки с «Silica» (Si02) проводили очистку ДНК иммуномагнитосепарацией на специальном приборе. В последнем случае осаждение изопропанолом не требуется.

Выделенную и очищенную ДНК растворяли в стандартно-солевом растворе (ССР), денатурировали в кипящей водяной бане в течение 5-10 мин, иммобилизовали на мембранные нитроцеллюлозные фильтры, предварительно обработанные раствором ЮхССР в виде точек, не допуская их перекрывания. Иммобилизованную ДНК фиксировали в течение 30 мин при 80С и гибридизовали с меченными ДНК-зондами. В качестве ДНК-зондов для растительных компонентов использовали фрагмент хлоропластной ДНК, меченный биотином. При этом в качестве ДНК-зондов животного и растительного происхождения использовали биотинилированную ДНК. Затем фильтры трижды отмывали от несвязавшегося зонда по 10 мин при комнатной температуре в промывочном растворе I, содержащем: 50 мл 20хССР, 10 мл 10% раствора ДСН и 440 мл дистиллированной воды. Далее осуществляли промывку в промывочном растворе П, содержащем 50 мл 20хССР; 450 мл дистиллированной воды. Проводили «забивку» фильтров в течение 40 мин при 37С, в растворе содержащем: 25 мг сухого молока; 22 мл раствора АР7.5; 3 мл 10% желатина. Раствор АР7.5 содержал: 5 мл 1М MgCl2; 20 мл 5М NaCl; 75 мл 1М трис рН 9.5, в одном литре дистиллированной воды. Затем фильтры промывали в растворе АР7.5 и помещали в 6 мл рабочего раствора коньюгата стрептавидин фосфатаза на 15 мин, при комнатной температуре. Фильтры промывали три раза по 10 мин в растворе АР7.5 и 1 раз в течение 5 мин в растворе АР9.5. Затем фильтры инкубировали при комнатной температуре в темноте в течение 20-30 мин в проявляющем растворе, содержащем: 4 мл раствора АР9.5; 17,6 мкл раствора хромогена тетразолия нитроголубого и 13,2 мкл раствора субстрата бром-хлор индолит фосфата. Результаты гибридизации оценивали визуально или по интенсивности окрашивания пятен, по сравнению с контрольными образцами.

Методика идентификации мяса на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией с использованием тест-систем SureFood.

Отбирали 40 мг пробы, гомогенизировали и переносили в пробирку типа Эппендорф объемом 2 мл. Протеиназу К расворяли в 2 мл воды. Добавляли 400 мл лизирующего буфера и 40 мкл протеиназы, содержимое пробирки перемешивали на Vortex, помещали в термомиксер и инкубировали при 50С в течение 20 мин при непрерывном встряхивании, затем центрифугировали в течение 5 мин при 10000 об/мин (для отделения нелизированных компонентов). Надосадочную жидкость переносили в чистую пробирку Эппендорфа на 1,5 мл. В пробирку добавляли 200 мкл связывающего буфера и хорошо перемешивали на Vortex. Содержимое пробирки переносили на фильтр, который предварительно помещали в центрифужную пробирку на 2 мл. Инкубировали при комнатной температуре в течение 1 мин. Центрифугировали при 10000 об/мин в течение 5 мин. Фильтрат удаляли, а фильтр помещали обратно в центрифужную пробирку.

Готовили буфер для промывки. Для этого к исходному раствору добавляли 42 мл 99,8% этанола, закрывали крышку и тщательно перемешивали раствор. Готовый раствор хранили с плотно закрытой крышкой.

На центрифужный фильтр добавляли 550 мкл буфера для промывки и центрифугировали при 12000 об/мин в течение 1 мин для промывки ДНК. Фильтрат удаляли, а фильтр помещали обратно в центрифужную пробирку и повторяли промывку еще раз.

После повторной промывки фильтр помещали обратно в пробирку и центрифугировали при 12000 об/мин в течение 2 мин для того, чтобы удалить остатки буфера для промывки с фильтра. Для последующего элюирования ДНК готовили горячий элюирующий буфер путем нагревания в термомиксере при 52С. Для каждой исследуемой пробы необходимо готовить 105 мкл буфера (с учетом испарения).